Izrada otiska spore – dokumenta. Dobivanje suspenzije spora - interesni klubovi

18.09.2021

Vodič za uzgoj gljiva.

Moskva 2004

1 dio

Groverov set. Instrumenti, preparati itd. 3

Izrada otiska 4

Proizvodnja suspenzije spora. 5

Priprema staklenki. 6

Priprema podloge. 10

Cijepljenje supstrata.14

Njega banke.16

Priprema pokrovnog tla. 21

Pokriti. Priprema staklenika. 27

Plodonosni. 29

2. dio

Uzgoj micelija u tekućem mediju. 33

Groverov set. Instrumenti, preparati itd.

Sve što vam je potrebno za uzgoj gljiva prema uputama u nastavku.

Naziv instrumenta	Kol	Oznaka dostupnosti	Predviđeno mjesto kupnje
Banka 720-800 ml. s poklopcem na navoj	4 stvari.		Trgovina za kućanstvo Ili kupite krastavce i uz njih pojedite votku
Čep od plastične boce	1 kom.
jednostavna olovka	1 kom.
Nož, škare	1 kom.
Odvijač za savijanje rubova otvora za ventil	1 kom.
Zavoj, širine 12 cm.	1 kom.
vata	1 grumen.
zrno pšenice	0,5 litara		Svijet soje na 6. parku
Lonac za kuhanje žita	1 kom.
Jedaća žlica	1 kom.
ekspres lonac	1 kom.
Alkohol	5-10 mjehurića.
Šprica 10 ml.	5 komada.		Ljekarna
igla štrcaljke	10 komada.		Ljekarna
Criket upaljač	3 kom.		ladice za duhan
Gumene rukavice	10 pari		Ljekarna
Vermikulit	2 pakiranja		cvijeće na 16. parku
Treset	Vermikulit X 2		cvijeće na 16. parku
Posuda za hranu 1,1 l.	3 kom.		Trgovina za kućanstvo
Folija	2 rolata		trgovina na veliko
Mala ekspandirana glina			cvijeće na 16. parku
prozirna folija	1 smotuljak		trgovina na veliko
Bilo koji lijek za kapaljku u bočicama od 400 ml.	5 boca		Ljekarna
Fruktoza	100 gr.		Svijet soje na 6. parku
petrijeva zdjelica	10 komada.
Mjerica za tekućine i suhe proizvode (žitarice)	0,5 l.		laboratorijska oprema na 3. park
Terarij	1 kom.		Zoo shop na 3., 5., 9. ili 13. parku

Pretpostavlja se da sami napravite ispis, pri kupnji - možete preskočiti sljedeće poglavlje.

Izrada otiska.

Neophodno.

Gljiva!!!
Britva (nož).
Alkohol.
Pinceta.
Petrijeva zdjelica (prema broju gljiva).

Postupak.

Dezinficirajte Petrijevu zdjelicu, pincetu, brijač.
Držeći se za stručak, klobuk prema dolje, odvojiti klobuk od stručka.
Pincetom stavite šešir u Petrijevu zdjelicu, sporama prema dolje.
Zatvoriti, ostaviti 24 sata.
Uklonite šešir, zatvorite šalicu.

Proizvodnja suspenzije spora.

Neophodno.

Otisak u Petrijevu zdjelicu.
Injekcija.
Alkohol.
Torba s patentnim zatvaračem.
Lonac za kuhanje žita.

Postupak.

Dezinficirajte vrećicu alkoholom.
Zakuhajte vodu u loncu.
Uvucite u štrcaljku.
Pričekajte nekoliko minuta.
Izlijte iz štrcaljke u stranu.
Ponovno povucite punih 10 ml. injekcija.
Izvadite štrcaljku u vrećici, ostavite sa strane da se ohladi.
Kako dezinficirati još 2 štrcaljke u paragrafu 3.4.
Nakon hlađenja svu vodu iz štrcaljke ulijte u Petrijevu zdjelicu, pomiješajte s njom.
Ukucajte 3 štrcaljke od otprilike 3,5 ml svaka. zatvorite kapice igle.
Stavite štrcaljke u čiste vrećice sa zatvaračem.
Inokulirajte najmanje 12 sati kasnije.

Priprema staklenki.

U našem slučaju koristit će se limenke krastavaca ili rajčice od 720 ml (800 g). (Bilo koje slične staklenke će poslužiti, ne morate ih koristiti.)

Uklonimo metalni poklopac i bilo kojim zaobljenim predmetom (na primjer, poklopcem boce) nacrtamo krug na njegovoj površini promjera 20-30 mm.

Zatim običnim škarama izrežite rupu u poklopcu.

Nakon što smo izrezali rupu, potrebno je saviti njegove rubove prema unutra. To se može učiniti s tupim, drvenim predmetom, kao što je oklagija, ili drškom od nečega, primjenjujući silu u dva smjera (dolje i bočno).

Ako je sve učinjeno kako treba, trebali biste dobiti nešto ovako.

Izrada tampona od pamučne gaze.

Sada morate napraviti tampon od pamučne gaze.

Da biste to učinili, odrežite zavoj ili komad gaze (zavoj bi trebao biti prilično širok, 10-12 cm) i presavijte ga u dva sloja.

Na zavoj stavimo komadić vate (vate treba biti dosta da tampon bude dovoljno gust).

Podignite rubove zavoja i zavežite ih užetom (ako se koristi nit, mora se saviti u nekoliko slojeva).

Nakon toga odrežite višak zavoja i konopa.

Gotov tampon umetnemo u rupu koju smo napravili, na poklopcu staklenke.

Tampon mora biti umetnut tako da jednako strši s obje strane poklopca (tj. potrebno je staviti poklopac otprilike u sredinu tampona).

Nakon što smo tampon uvukli u rupicu, potrebno ga je, istovremeno, snažno pritisnuti dlanovima odozgo i odozdo. Time se osigurava da rubovi tampona izlaze izvan rubova otvora, što zauzvrat sprječava ulazak bakterija kroz razmak između tampona i kapice.*

*Kako bi se spriječio ulazak bakterija, tampon mora biti gust, što je gušći to je manja mogućnost ulaska bakterija (ali ne treba pretjerivati jer inače zrak neće moći proći kroz tampon ). Tampon se izrađuje oko 1,5 puta veći od veličine rupe u koju će se umetnuti.

Staklenka s tamponom izgleda ovako:

Priprema podloge.

Žito se najprije mora prokuhati.

Za svaku staklenku koju koristimo potrebno nam je 150-170 ml (ne grama) zrna. Potrebnu količinu lako je odrediti pomoću mjerne posude za tu svrhu.

Zrno, ulijte u lonac ili kutlaču u volumenu koji je potreban za pripremu potrebnog broja staklenki.

Napunite vodom.

I staviti na šporet da se kuha.

Zrno kuhajte dok se ne skuha *, potrebno vam je oko 30-40 minuta. (sve ovisi o količini).

*Zrno se smatra spremnim kada se na površini pojave odvojena, kuhana zrna, treba ih biti malo, oko 5-7% ukupne mase.

Voda do tog vremena gotovo potpuno proključa.

Nakon što je žito kuhano, potrebno ga je oprati hladnom vodom.

Voda će isprva biti mutno smeđa, a zatim će postati potpuno prozirna. To se radi kako se zrno ne bi slijepilo.

Zatim voda mora biti potpuno (!) Isušena, a zrno se razlaže u staklenke.

Ako je sve učinjeno kako treba, zrno će zauzeti oko 1/2 volumena limenke.

Sada, staklenke sa žitaricama treba sterilizirati. Za sterilizaciju je bolje koristiti ekspres lonac, ali poslužit će i obični lonac.*

*Prije sterilizacije potrebno je na dno posude staviti komad krpe ili koristiti neki drugi “stalak” (npr. preokrenuti tanjur), kako staklenke ne bi dolazile u dodir s dnom posude. posudu i nemojte prsnuti tijekom sterilizacije. Vodu u lonac treba sipati tako da prekrije dno staklenki i da ne proključa dok se staklenke steriliziraju.

Optimalno vrijeme sterilizacije je 1 sat.

Bolje je ne vaditi staklenke iz ekspres lonca ili posude dok se potpuno ne ohlade. Ako se staklenke izvade odmah nakon sterilizacije, one će zbog razlike u tlaku početi uvlačiti hladan zrak, a to može dovesti do toga da zajedno sa zrakom u staklenku dospiju i mikroorganizmi koji kasnije mogu uzrokovati kontaminaciju podloge.

Nakon sterilizacije staklenke sa supstratom se trebaju ohladiti na sobnu temperaturu (bolje je cijepiti dan kasnije (zajamčeno razdoblje) nakon završetka sterilizacije).

Nakon sterilizacije zrno se malo povećalo, te sada zauzima oko 2/3 volumena staklenke.

U tegli nigdje ne smije biti slobodne vode, a zrno bi trebalo izgledati suho i, kada se lupka šakom po tegli, lako se raspadati u pojedinačna zrnca.

Ako je tako, onda je sve učinjeno ispravno.

Inokulacija supstrata.

Inokulacija pripremljenom štrcaljkom sa suspenzijom spora.

Ako koristite gotovu štrcaljku sa suspenzijom spora, tada postupak inokulacije ne bi trebao uzrokovati posebne probleme.

S obzirom na to da supstrat i suspenzija spora ostaju u hermetički zatvorenim posudama, inokulacija ne zahtijeva prethodnu sterilizaciju prostorije u kojoj ćete raditi. Također možete učiniti bez upotrebe gumenih rukavica i zavoja od gaze na licu (iako, naravno, sve ove mjere opreza značajno smanjuju rizik od kontaminacije podloge).

Uzimamo staklenku i obilno navlažimo tupfer alkoholom, ali tako da alkohol ne počne kapati na zrno.

Nakon toga uzmemo pripremljenu špricu sa suspenzijom spora, a iglu zapalimo iznad plamena plamenika.

Igla mora biti užarena.

Potom iglu spustimo u staklenku s alkoholom (to se radi kako bi se igla ohladila, a ne opekla vatu).

Zatim probušimo tampon natopljen alkoholom * i ubrizgamo određenu količinu suspenzije spora u posudu sa zrnom. Za inokulaciju jedne staklenke dovoljno je 2-3 ml suspenzije spora.

*Uvjerite se da je igla prošla kroz štapić i da se njen vrh pojavi unutar staklenke. Ako se to ne dogodi, sve će spore završiti u brisu.

Ako iz nekog razloga nije moguće probušiti tupfer, cijepljenje se može obaviti pažljivim otvaranjem poklopca staklenke (prije cijepljenja staklenku je potrebno obrisati alkoholom).

Njega banke.

Nakon inokulacije, staklenke sa zrnom moraju se ukloniti na tamno i toplo (25-30C) mjesto. Budući da prisutnost svjetla, čak iu malim količinama, koči razvoj micelija, ako ne možete staviti staklenke na tamno mjesto, potrebno ih je umotati u foliju ili neki drugi neprozirni materijal.

2-3 dana nakon inokulacije (ako je inokulacija bila uspješna), komadić agara će početi obrasti micelijskim dlačicama, a na mjestima kontakta sa zrnom micelij će se početi pomicati na podlogu.

Micelij raste prilično brzo i svakim danom razvija sve veću površinu supstrata, prelazeći preko zrna i formirajući potpuno obrasla područja.

Čim se micelij počeo aktivno širiti po supstratu i pojavila su se potpuno obrasla područja nekoliko zrna, supstrat se može "protresti".

Tijekom mućkanja, područje supstrata obraslo micelijem raspada se u zasebna zrna koja, padajući na nova mjesta, formiraju nekoliko novih žarišta razvoja micelija odjednom - to značajno smanjuje vrijeme da micelij savlada supstrat i doprinosi do njegovog ujednačenijeg obraštanja.

No, budući da većina zrna još nije obrasla micelijem, a opasnost od zaraze je još prevelika, supstrat treba vrlo pažljivo protresti. Prilikom mućkanja morate paziti da zrno što manje dodiruje poklopac staklenke i tampon. Na tim mjestima mogu biti strani mikroorganizmi koji su se probili "izvana" što može dovesti do kontaminacije supstrata. Staklenku ne treba “tresti” s jedne strane na drugu, već je jednom rukom držati drugom rukom po dnu staklenke.

Tako će se supstrat miješati na dnu tegle, gotovo da ne ulazi u njen gornji dio.

Odmah nakon protresanja supstrata zrna obrasla micelijem gube svoju “pahuljastost” i gotovo ih je nemoguće pronaći u ukupnoj masi.

Ali već nakon 1-2 dana, na nekim zrnima postaju vidljive bijele točkice micelija, koje se brzo povećavaju i, prelazeći na susjedna zrna, osvajaju nove teritorije.

Nakon nekoliko dana micelij preraste supstrat i ponovno formira potpuno obrasla područja.

Kada se to dogodi, potrebno je ponoviti protresanje podloge.

Svakim novim protresanjem supstrata sve je više žarišta razvoja micelija.

I rast je sve brži.

Obično je potrebno 3-5 tjedana za potpuni rast supstrata s micelijem, ovisno o temperaturi okoline.

Što manje supstrat ostane neiskorišten od strane micelija, to je manji rizik od njegove infekcije tijekom mućkanja.

Ali ipak, protresite supstrat što je pažljivije moguće, jer. ako ipak dođe do infekcije, supstrat će se morati baciti, a staklenka će se morati ponovno sterilizirati. I bit će vrlo razočaravajuće ako se to dogodi na samom kraju kolonizacije supstrata.

Ako ipak dođe do kontaminacije supstrata, supstrat iz ove staklenke mora se baciti. Neke plijesni sadrže toksine i mogu biti vrlo štetne za ljudsko zdravlje. Stoga je lakše izbaciti zaraženi supstrat i pripremiti ga iznova.

Normalna boja micelija je bijela, dopuštena je samo bijela s blagom plavkastom ili žućkastom nijansom. Normalan miris micelija je gljiva, ali se miris micelija praktički ne osjeti, može se osjetiti ili odmah nakon protresanja supstrata (već u završnoj fazi, kada je gotovo svo zrno obraslo micelijem), ili prilikom prijenosa supstrat iz tegle u posudu. Sve druge boje i mirisi znak su onečišćenja podloge.

Zrno potpuno obraslo micelijem izgleda ovako:

Nakon što se supstrat potpuno (!) naseli micelijem, može se presuti u posude za poticanje plodonošenja.

Priprema pokrovnog tla.

Pokrivno tlo priprema se od mješavine treseta i vermikulita u omjeru 2/1.

Uzimamo odgovarajuću posudu i u nju ulijemo 2 dijela treseta.

Zatim tamo ulijemo jedan dio vermikulita.

Zatim sve miksamo dok ne dobijemo homogenu masu.

Sada pokrovno tlo treba navlažiti. Da bismo to učinili, dodamo vodu u našu smjesu. Obično, za postizanje optimalne vlažnosti, vode je potrebno približno isto kao vermikulit (1 dio), možda malo više.

Temeljito promiješajte dok se ne dobije homogena masa.

Sadržaj vlage u pokrovnom tlu može se jednostavno provjeriti stiskanjem šake. Ako u isto vrijeme kapljice vode strše između prstiju, onda je vlažnost zraka optimalna, ako kapi ne strše, treba dodati malo vode, ako voda istječe u mlazovima, smjesi treba dodati vermikulit ili treset ( vermikulit bolje upija vlagu).

Nakon što se smjesa pripremi, pokrovno tlo mora se sterilizirati. Da biste to učinili, stavite ga u banku.

Staklenku zatvorimo poklopcem (poklopac se može čvrsto zatvoriti, budući da je pokrovna zemlja prilično rahla, staklenka neće eksplodirati pod pretjeranim pritiskom).

Stavili smo u ekspres lonac.

I sterilizirati 30-60 minuta. Nakon sterilizacije, smjesa za premazivanje treba se ohladiti na sobnu temperaturu (koristite temeljni premaz, po mogućnosti dan nakon završetka sterilizacije).

Pokriti.

Sada treba supstrat obrastao micelijem usuti u plastičnu posudu i "pokriti" ga pokrovnom zemljom.

Sve operacije moraju se izvoditi u sterilnim uvjetima, radeći u gumenim rukavicama i zavojem od gaze. Prije početka rada sve radne površine potrebno je prebrisati alkoholom.

U našem slučaju koristit će se obična, plastična posuda za hranu zapremine 1,1 litre.

Posudu obrišemo alkoholom (iznutra i izvana).

Zatim, prethodno obrisavši staklenku sa supstratom alkoholom, otvorimo poklopac * i u posudu usipamo zrno ** obraslo micelijem.

*Kako bi se poklopac staklenke lako otvorio, potrebno ga je prethodno odvrnuti, a zatim labavo poklopiti i obrisati alkoholom.

**Da bi se zrno lako izlilo iz limenke, zrno je potrebno prethodno "razbiti" (tj. učiniti isto kao i kod protresanja supstrata).

Zatim, razbijajući velike komade micelija, manje-više izravnavamo površinu.

Nakon toga, prethodno obrisavši teglu s pokrovnom zemljom alkoholom, supstrat "pokrijemo" nasipajući zemlju u sloju od 2-3 cm.

Bez pritiskanja tla (!) Više-manje izravnavamo površinu.

Pokrivno tlo mora izgledati "prozračno" i ne smije stvarati velike grudice, ako su grudice i dalje prisutne, moraju se ukloniti ili jednostavno zgnječiti. Micelij ne smije biti vidljiv na površini pokrovnog sloja. Ako se to iznenada dogodilo, pospite ovo mjesto zemljom.

Sada morate omotati posudu folijom. Najprikladnije je to učiniti u sljedećem redoslijedu: Raširimo foliju, stavimo posudu na nju i zamotamo je na vrh.

Zatim od rolata odrežemo foliju i savijemo je s jedne strane.

Nakon toga podignite sve rubove i savijte ih do vrha.

Sada se spremnik(i) mora ukloniti na tamno i toplo mjesto na period od 1 tjedna. Budući da folija ne propušta svjetlost, dovoljno je posude staviti u prostoriju s temperaturom od 25-30C. Nakon tjedan dana, micelij će probiti pokrovno tlo, a spremnik se može staviti u staklenik da počne plodonositi.

Priprema staklenika.

U našem slučaju, obični terarij, koji se prodaje u bilo kojoj trgovini za kućne ljubimce, koristit će se kao staklenik. Zašto terarij? Budući da njegov dizajn ne zahtijeva gotovo nikakve preinake, au isto vrijeme ispunjava sve zahtjeve koji mu se postavljaju.

Terarij je vrlo zgodan za otvaranje, može primiti do 6 posuda (potrebno je odabrati pravu veličinu), ima proziran vrh koji savršeno propušta dnevno svjetlo, a tu je i nekoliko tehnoloških rupa koje možete koristiti po vlastitom nahođenju ( na primjer, za automatizaciju sustava ventilacije i (ili ) vlage).

Prije upotrebe terarij je potrebno temeljito oprati.

Ako nećete koristiti automatski sustav ventilacije i ovlaživanja, onda je bolje zatvoriti tehnološke rupe folijom.

Na dno terarija sipa se fina ekspandirana glina (prethodno temeljito oprana) u sloju od 1-2 cm.

Nakon što smo izlili ekspandiranu glinu, mora se izravnati.

Zatim je potrebno uliti vodu u terarij tako da sloj ekspandirane gline bude otprilike do pola uronjen u vodu (tj. da razina vode dosegne otprilike sredinu sloja ekspandirane gline). Na taj način se postiže najučinkovitija površina, za maksimalno isparavanje vode.

U poklopac terarija postavlja se odvojiva ventilacijska rešetka (kako bi životinje u terariju mogle slobodno disati) za stvaranje staklenika, mora se omotati s 2-3 sloja prozirne folije po cijeloj površini. Film za hranu sigurno se drži na rešetki tijekom cijelog razdoblja rada terarija, ne dopušta isparavanje vlage i savršeno propušta svjetlost. Proreze koji ostaju na mjestima gdje je rešetka pričvršćena na poklopac terarija nije potrebno zatvarati, stvaraju dodatnu cirkulaciju zraka i osiguravaju potrebnu ventilaciju staklenika.

Vlažite staklenik prskanjem vode iz obične kućne prskalice na poklopac terarija. Takvu hidrataciju treba provoditi 2 puta dnevno (ujutro i navečer). Nema potrebe dodavati vodu u terarij. Višak vlage, koja se kotrlja s poklopca terarija, skuplja se na dnu i ponovno isparava zbog povećane površine zbog ekspandirane gline.

Plodonosni.

Tjedan dana nakon premazivanja (tjedan dana je optimalno razdoblje, odabrano empirijski), izvadimo posudu(e) i skinemo foliju. Lakše je ne odmotavati foliju, nego zarezati vrh nožem ili skalpelom (postupak je sličan otvaranju kiselog vrhnja). ;)

Do tog vremena micelij bi se trebao pojaviti mjestimično na površini omotača. Ako na površini ima previše micelija, to znači da je ili posuda stajala više od tjedan dana ili je debljina pokrovnog sloja manja od 2-3 cm.

Još jednom vas želim podsjetiti da sam i debljinu pokrovnog sloja i vrijeme predviđeno za fazu aktivnog rasta micelija u pokrovnom sloju izabrao empirijski, prilično dugo i da su, po mom mišljenju, optimalni .

Micelij bi tek trebao početi probijati pokrovni sloj.

Naše posude postavljamo u terarij.

I nakon vlaženja zatvorite poklopac.

Sada je terarij potrebno postaviti na mjesto gdje će biti dnevnog svjetla, ali gdje neće biti izložen direktnoj sunčevoj svjetlosti. Najprikladnije je mjesto nedaleko od prozora.

Nakon nekoliko dana micelij probije gotovo cijelu površinu plaštane soli.

Tada se čini da se rast micelija usporava, a na njegovoj se površini počinju pojavljivati okrugle plombe - primordije.

Doslovno sljedeći dan, u ovim pečatima već je moguće razlikovati šešir i nogu buduće gljive.

Terarij treba i dalje provjetravati i vlažiti dva puta dnevno (ujutro i navečer).

Ako su temperatura i vlažnost u stakleniku optimalni, gljive se razvijaju prilično brzo.

I već za 2-4 dana narastu do veličine 5-10 cm (ovisno o vrsti gljive).

Gljive treba brati u trenutku kada se kod većine gljiva počne pucati koprena koja prekriva sporni sloj.

Nakon tog trenutka, gljive vizualno nastavljaju rasti, ali više ne dolazi do rasta mase gljiva. Istovremeno s pucanjem vela smanjuje se i količina psihoaktivnih tvari sadržanih u tijelu gljive.

Stoga, ako ne planirate napraviti otisak spora, gljive se moraju ubrati odmah nakon kidanja vela.

Uzgoj micelija u tekućem mediju.

U bilo kojoj ljekarni kupujemo bilo koji lijek za kapaljku. Lijek se prodaje u 400 ml. i 200 ml. staklene boce s gumenim čepovima.

Ovako izgleda boca:

Trebalo bi ispasti ovako:

Zatim pomoću dvije igle i jedne šprice (po mogućnosti velikog volumena) ispumpamo sadržaj boce. Pogodnije je koristiti točno dvije igle, a ne isisati tekućinu iz boce, već naprotiv, napuniti bocu zrakom. Kao rezultat viška tlaka, tekućina se potpuno uklanja iz boce u roku od nekoliko minuta.

Naravno, da bi tekućina iscurila, boca mora biti okrenuta naopako.

Nakon što se sva tekućina ukloni iz boce. Pumpamo u bocu, oko 100 ml. čistom vodom i snažno protresite. To se radi kako bi se bočica isprala i konačno se riješili ostataka lijeka. Bolje je učiniti ovaj postupak 2-3 puta.

Sada pripremamo hranjivu otopinu. Otopina se također može pripremiti od meda, ali, po mom mišljenju, prikladnije je koristiti fruktozu. Prvo, lakše je kontrolirati koncentraciju otopine mjerenjem potrebne količine tvari, a drugo, otopina nema apsolutno nikakve boje (što olakšava otkrivanje micelija :)), osim toga, fruktoza se prodaje posvuda i u po svom sastavu, ona je potpuno ista, a također, fruktoza se može čuvati prilično dugo, bez vidljivih promjena.

Za pripremu otopine potrebno je potpuno otopiti fruktozu u vodi. Preporučena koncentracija je 2 grama fruktoze na 100 ml. voda. Povećane koncentracije fruktoze u otopini dovode do stvaranja „tekućeg“ micelija, odnosno kod pripreme 4% otopine fruktoze micelij će se i nakon dužeg vremena lako usisati u štrcaljku kroz igla. A pri nižim koncentracijama, na primjer, pri pripremi 1% otopine fruktoze, micelij će nakon nekog vremena formirati prilično guste ugruške koje je vrlo teško izvući kroz iglu, ali u ovom obliku micelij se duže čuva.

Otopina treba pripremiti oko 300 ml. (ako se koristi boca od 400 ml). Ako se koristi boca manjeg volumena, tada otopinu treba pripremiti otprilike 2/3 volumena boce. Ne smijete puniti bocu otopinom "do očnih jabučica", jer tijekom daljnje sterilizacije, kao rezultat zagrijavanja, aluminijski rub koji drži čep možda neće izdržati. Zatim upumpajte otopinu u bocu. I za ovo je bolje koristiti dvije igle i jednu špricu. Druga igla će omogućiti izlazak zraka iz boce bez stvaranja viška pritiska. Nakon što smo otopinu ulili u bočicu treba je sterilizirati.

Bočicu možete sterilizirati i u loncu i u ekspres loncu. Jedini uvjet je da se sterilizacija ne smije provoditi dulje od 30 minuta, inače može doći do karamelizacije fruktoze, a na njoj ništa neće rasti.

Nakon sterilizacije ostavite bocu da se ohladi na sobnu temperaturu. I tek nakon potpunog hlađenja cijepimo suspenzijom spora. Zatim stavimo bocu na toplo (~ 25C), tamno mjesto i čekamo rezultate. Nakon 24-48 sati micelij obično počinje brzo rasti. Ali u nekim slučajevima, prvi znakovi rasta micelija pojavljuju se tek 5-7 dana. U svakom slučaju, tjedan dana je kontrolno razdoblje, ako se tijekom tog vremena ništa nije dogodilo, a rješenje je još uvijek apsolutno transparentno, vrijedi sve ponoviti.

Ovako uzgojen micelij treba čuvati u hladnjaku. Ova metoda nije prikladna za dugotrajno skladištenje. Maksimalni, zajamčeni rok trajanja: 2 mjeseca.

Osnove agara

Što je agar i gdje ga nabaviti

Postupak kuhanja

Inokulacija

Inkubacija

Skladištenje kulture

Izolacija čiste kulture

Uklanjanje izvora infekcije

Transplantacija micelija

agar(zastarjeli naziv agar-agar) - proizvod dobiven od crvenih i smeđih algi ( kao što su Eucheuma spinosum Ag., E. gelatinae Ag., Gelidium cartilagineum (Grev. i drugi.) i stvaranje gustog želea u vodenim otopinama. To je bijeli prah nalik brašnu.

Sastoji se uglavnom od polisaharida. Koristi se kao dio hranjivih podloga za uzgoj bakterija, gljivica, algi, kao iu konditorskoj industriji, u proizvodnji žele marmelada, želea, pudinga, želea od mesa i ribe itd.

Biološki (laboratorijski) agar razlikuje se od prehrambenog agara po višoj kvaliteti, dok je cijena prehrambenog agara znatno niža. Kada se koristi kod kuće, kvaliteta agara nije toliko značajna, pa ima smisla uzeti agar koji se koristi u konditorskoj industriji.

Prehrambeni agar se dijeli po gustoći, na primjer: Agar M 500, Agar G 700, Agar -900 itd. Što je veći broj u nazivu, veća je viskoznost / gustoća dobivenog gela / želea. Proporcionalno povećanju gustoće smanjuje se potrošnja agara, ali istodobno raste njegova cijena.

Ako je gustoća agara nepoznata, njegova se potrošnja može odabrati eksperimentalno, dobivajući medij koji u konzistenciji podsjeća na marmeladu. Ako je medij premekan, bit će vam teško nositi izrezane komade.

Gdje se agar prodaje možete pronaći na web stranici časopisa robu i cijene upisivanjem riječi "agar" u traku za pretraživanje.

Za uzgoj micelija viših bazidiomiceta koriste se različite hranjive podloge na bazi agara. Ovisno o vrsti koja se uzgaja, kao io postavljenim ciljevima, hranjivi mediji mogu varirati u sastavu, Ph razini, viskoznosti itd.

Nećemo se zadržavati na pripremi složenih agar medija, oni koji su zainteresirani za ovo pitanje lako mogu pronaći potrebne informacije u relevantnoj literaturi. Razmotrite pripremu dvaju najjednostavnijih, au isto vrijeme pogodnih za uzgoj velikog broja vrsta gljiva, hranjivih medija - srednjeg na zrnu i srednjeg na juhi od krumpira.

2. dio

Hranjivi medij iz juhe žitarica

Spoj: Juha od žitarica * -100 ml **; agar - 1,5 g ***

* Uvarak koji vam je ostao nakon kuhanja žitarica možete koristiti (ako žito koristite kao podlogu), ali samo ako je žito kuhano bez dodavanja H2O2. Inače se agar jednostavno neće stvrdnuti.

** Potrošnja medija po jednoj Petrijevoj zdjelici od 100 mm ~ 30-50 ml.

*** Kada se koristi 900. agar.

Postupak kuhanja

Uzimamo oko 100 ml žitarica (pšenica, raž, ječam, zob, itd.),

ulijte u posudu

staviti na gas

dovesti do vrenja

Za to vrijeme će dio vode prokuhati, a ostatak će poprimiti ugodnu tamnosmeđu boju.

Dobivena juha mora se filtrirati. Kao filter možete koristiti gazu presavijenu u nekoliko slojeva ili pamučnu tkaninu. Stavljaju se u sito ili lijevak i pažljivo se ulije juha.

Zrnca i sitne čestice preostale na filtru se odbacuju.

Ako je količina izvarka manja od očekivane, dovedite je do željenog volumena dodavanjem potrebne količine vode (koristi se obična voda iz slavine).

Dobivena juha se ulije u malu posudu,

Stavimo na plin, prokuhamo i smanjimo vatru.

Miješajući, juhu ponovno zakuhajte.

Nastavljajući neprestano miješati, postižemo POTPUNO otapanje agara. Kada se to dogodi, okolina je spremna.

Nakon pripreme pripremljenu podlogu odmah ulijte u Petrijeve zdjelice. (Petrijeve zdjelice izrađene su od kaljenog stakla kako ne bi prsnule.)

Ulijte medij, a zatim sloj od 3-5 mm.

Nakon toga pokrijte Petrijeve zdjelice,

I stavljajući ih jednu na drugu u neku vrstu tanjura ili tanjurića (bit će ih zgodnije nositi s mjesta na mjesto),

Stavimo u ekspres lonac (ili tavu),

I sterilizirano 1 sat.

Hranjivi medij iz juhe od krumpira

Spoj: Juha od krumpira -100 ml; agar - 1,5 g.

Postupak kuhanja

Uzimamo 150 g krumpira,

Temeljito ga isperite sa zemlje,

Bez guljenja narezati na kockice ~ 1x1 cm,

Ulijte u posudu

Ulijte 500 ml vode (koristi se obična voda iz slavine),

Stavili smo gas

Pustite da prokuha

Zapalimo malu vatru i kuhamo 30 minuta.

Za to vrijeme će dio vode prokuhati, a ostatak će poprimiti svijetložutu boju.

Dobivena juha također se mora filtrirati.

S gotovom juhom radimo isto kao u prethodnom slučaju.

Izrada petlje za cijepljenje

Uzimamo najdužu iglu koju možemo pronaći ("komplet igala za šivanje lutaka" je odličan),

Zagrijavamo ga,

I ne baš jako, spljoštiti čekićem 1-2 cm vrha.

Trebalo bi biti nešto slično.

Stezanjem samog vrha igle (5-7 mm) u škripac, savijamo ga pod pravim kutom (slovo "G"),

I malo spljoštite sa strane. *

*Ovo se radi kako bi se osigurao bolji kontakt petlje za cijepljenje kada je u kontaktu s površinom.

Sada izrađujemo olovku - omotamo suprotni kraj igle električnom trakom.

Rezultat je takva (vrlo prikladna za rad sa sporama) petlja za cijepljenje.

Inokulacija

Pazite da ne pomaknete poklopce., izvadite Petrijeve zdjelice iz ohlađenog ekspres lonca i štrcaljkom ispumpajte vodu nakupljenu u tanjuriću.

Kondenzacija koja se stvara unutar, na poklopcima Petrijevih zdjelica, nije opasna.

Inokulacija se mora provoditi u sterilnim uvjetima! Da biste to učinili, svi potrebni alati (omča za inokulaciju, skalpel, vata, alkohol, plamenik itd.), kao i pripremljene Petrijeve zdjelice, prenose se u prostoriju, koja se zatim neko vrijeme tretira baktericidnom svjetiljkom* .

*(30-60 min., ovisi o veličini prostorije i snazi lampe.)

Ulazeći u sobu, rasporedimo alate tako da nam je zgodno raditi. Sve površine obrišemo alkoholom.

Uronite petlju za inokulaciju u alkohol,

i kalcinirao ga užaren nad plamenom plamenika.

Zatim ponovno uronite u alkohol,

prinesemo plameniku i tu (dok alkohol gori) nosimo omču u petrijevu zdjelicu.

Malo lagano otvorivši poklopac (bez pomicanja u stranu), uronimo petlju za cijepljenje u agar*.

*Ovim se osigurava da inokulacijska petlja postane ljepljiva od otopljenog agara koji je ostao na njoj. (Također hladi petlju za inokulaciju na temperaturu koja je sigurna za spore.)

Odmah nakon toga, malo malo otvorivši vrećicu s otiskom, bez dodirivanja njezinih rubova, cijepnom petljom ostružemo dio spora*.

*Ako je otisak dobre kvalitete, dovoljno je samo dodirnuti omču da se na nju zalijepe tisuće spora. Ako je otisak vrlo blijed, oštrim krajem omče za cijepljenje možete temeljito strugati po papiru kako biste uhvatili dio spora zajedno s česticama papira.

Nakon toga odmah premjestite inokulacijsku petlju natrag u Petrijevu zdjelicu, a također, lagano otvorivši poklopac (bez pomicanja u stranu), dodirnite površinu agara na nekoliko mjesta.

Ako je bilo dovoljno spora, one će biti vidljive na površini agara. Ako je bilo malo spora, na agaru će ostati samo tragovi kontakta s inokulacijskom petljom. U svakom slučaju, spore su dospjele na hranjivu podlogu, u povoljnim uvjetima, i trebale bi proklijati za nekoliko dana.

Obavezno označite svoje Petrijeve zdjelice (ime vrste, datum inokulacije itd., što god mislite da je potrebno), inače ćete se kasnije zbuniti što gdje raste.

Sada se Petrijeve zdjelice moraju omotati prozirnom folijom. To se radi kako bi se spriječio prodor stranih mikroorganizama u njih.

Stavite film na vrh Petrijeve zdjelice,

podignite Petrijevu zdjelicu dok spuštate film

i izrežite ga s malom marginom.

Sada povlačimo rubove filma prema dolje po cijelom obodu Petrijeve zdjelice,

i uvijati ih (kao omot bombona).

Uvijeni rubovi čvrsto se stisnu rukom

iu ovom obliku, Petrijeve zdjelice sklonimo na tamno, toplo (23-27C) mjesto, za cijelo vrijeme inkubacije.

Inkubacija

Nakon 3-10 dana (ovisno o količini i kvaliteti spora), spore klijaju – na mjestima inokulacije pojavljuje se bijelo paperje micelij.*

* Micelij bilo koje druge boje ili konzistencije (kao što je film ili sluz) jasan je znak infekcije i mora se odmah ukloniti.

Nakon nekoliko dana, žarišta micelija postaju veća i nastavljaju rasti.

Žarišta micelija mogu se pojaviti ne samo na mjestima gdje su u kontaktu s inokulacijskom petljom, već i po cijeloj površini agara. To je zato što su dok ste rukovali unutrašnjosti Petrijeve zdjelice neke spore same otpale s inokulacijske petlje i sada su proklijale. Također, spore bi se mogle pomicati kao rezultat kretanja tekućine (padanje kapljica kondenzata).

Ako tijekom razdoblja inkubacije ne dođe do kontaminacije medija stranim mikroorganizmima, nakon 3-4 tjedna micelij u potpunosti svladava površinu agara.

Skladištenje kulture

Nakon micelija potpuno svladati površinu agara, Petrijeve zdjelice se uklanjaju radi skladištenja u hladnjaku. Na temperaturi od + 3-5 ° C usporavaju se životni procesi micelija, au takvim uvjetima može se sačuvati nekoliko godina. Tijekom tog vremena, micelij postupno jede hranjivi medij, stoga, što je deblji njegov sloj, to će se dulje micelij moći hraniti.

Po potrebi se Petrijeve zdjelice s micelijem vade iz hladnjaka i odrežu komadići agara za inokulaciju* ili za presađivanje kulture na svježu hranjivu podlogu.**

*Za inokulaciju se odreže mali (~ 1x1 cm) komadić agara s micelijem i stavi u posudu sa supstratom. Nakon nekoliko dana, micelij prelazi na supstrat i postupno ga u potpunosti svladava. Fotografije radova na inokulaciji komadićima agara možete pogledati u ilustrirani vodič za uzgoj gljiva.

Budući da je mali komadić agara dovoljan za jednu inokulaciju, jedna Petrijeva zdjelica od 100 mm dovoljna je za 20-30 inokulacija.

**Ova metoda pohrane naziva se " metoda vegetativne pasaže", omogućuje vam da sačuvate dobivenu kulturu gotovo nepromijenjenu. Što se rjeđe ponovno sjetve događa, kultura prolazi manje podjela stanica i što je bliža svojim svojstvima izvornom izolatoru. U ovom slučaju, preporuča se presaditi micelij na novi medij ne više od jednom godišnje.

Za dugo za skladištenje kultura, prikladno je koristiti nagnute epruvete s agarom. Pripremljeni medij se ulije u epruvete, zatvori čepom od pamučne gaze i nakon sterilizacije, dok se agar ne smrzne, postavi u nagnuti položaj - agar se kosi. Nakon što se agar skrutne, epruvete se inokuliraju micelijem, pusti se da površina agara potpuno naraste i pohrani u hladnjak.

Trajanje skladištenja u ovom slučaju postiže se smanjenjem područja rasta micelija i povećanjem debljine hranjivog sloja (u usporedbi s Petrijevom zdjelicom).

Izolacija čiste kulture*

* Čista kultura su mikrobne stanice iste vrste. (U našem slučaju to je micelij uzgojene gljive).

Ako je tijekom rasta micelija okoliš zaražen stranim mikroorganizmima, potrebno je što prije odvojiti čisti micelij od konkurentske mikroflore. To se može učiniti na dva načina.

1. Uklanjanje izvora infekcije

U slučaju "točkaste infekcije" (kada je izvor infekcije malen i lokaliziran na jednom mjestu), lakše ju je izrezati i baciti, a glavni dio micelija ostaviti nedirnutim.

Rad na izolaciji čiste kulture mora se provoditi u sterilnim uvjetima!

Uzimamo Petrijevu zdjelicu u kojoj je došlo do infekcije,

uđemo s njim u sterilnu prostoriju, sve površine obrišemo alkoholom, skalpel uronimo u alkohol, zapalimo ga na plamenu plamenika, ponovno uronimo u alkohol, prinesemo plameniku i odmah (dok alkohol gori) , nosimo u Petrijevu zdjelicu. *

Lagano otvorivši poklopac (bez pomicanja u stranu), izrežite skalpelom komadić agara na kojem raste plijesan,

pokupite ga vrhom skalpela i uklonite.

Petrijevu zdjelicu s uklonjenim izvorom zaraze omotamo prozirnom folijom i stavimo na tamno, toplo mjesto tijekom cijelog razdoblja inkubacije. *

*Pogledajte fotografije sličnih koraka cijepljenja.

Ako ne dođe do infekcije stranim mikroorganizmima, nakon nekog vremena (ovisno o tome u kojoj fazi rasta micelija je žarište infekcije uklonjeno), micelij će potpuno zavladati površinom agara.

2. Transplantacija micelija

U slučaju kada strana mikroflora zauzima značajan dio, a nije ju moguće izrezati, iz zaražene Petrijeve zdjelice izvadi se komadić agara s čistim micelijem i presadi na novu podlogu u drugu Petrijevu zdjelicu.

Uzimamo petrijevu zdjelicu u kojoj je došlo do infekcije, ulazimo s njom u sterilnu prostoriju, obrišemo sve površine alkoholom, skalpel uronimo u alkohol, kalciniramo ga na plamenu plamenika, ponovno uronimo u alkohol, prinesemo plameniku. i odmah (dok alkohol gori) nosimo u Petrijevu zdjelicu.*

*Pogledajte fotografije sličnih koraka pri radu s inokulacijskom petljom.

Lagano otvorivši poklopac (bez pomicanja u stranu), izrežite skalpelom komadić agara s čistim micelijem,

zakačite ga vrhom skalpela

i prenijeti na novi medij, u drugu Petrijevu zdjelicu.

Petrijevu zdjelicu pokrijemo, potpišemo, omotamo prozirnom folijom i stavimo na tamno toplo mjesto za cijelo vrijeme inkubacije.*

*Pogledajte fotografije sličnih koraka cijepljenja.

Poslije nekoliko dana presađeni komadić će biti prekriven micelijem, a nakon još nekoliko dana micelij će se preseliti u novi medij. Ako ne dođe do infekcije stranim mikroorganizmima, nakon 3-4 tjedna micelij će u potpunosti zavladati površinom agara.

Žetva

Dakle, dugoočekivana funta izašla je iz vaše čudesne tube, što je sljedeće?

Ako uzgajate iz višespora, gljive će očito varirati u veličini i zrelosti. Mnogi priručnici kažu da se cijeli val mora ukloniti odjednom, jer će se neotvorene gljive nakon navodnog šoka prestati razvijati itd. Zapravo, to nije sasvim točno. Pa, zamislite sebe na mjestu gljiva: raširite svoju mrežu, počnete je gurati u rast, a onda dotrče slonovi / krave / bube i požderu / izgaze neke od vas. Glupo je prestati rasti na cijeloj mreži zbog ovoga. Zadatak je preživjeti, kao i sva živa bića. Stoga možete skupljati val više puta.

Trenutak u kojem je gljiva spremna za berbu za svakoga je drugačiji. Ako trebate otiske, onda, naravno, trebate pričekati da se šeširi otvore. Ako otisci nisu potrebni, možete pokupiti neotvorene. Oni koji su bili u gollashki primijetili su da tamo prodaju svježe kocke u stanju s neotvorenim šeširom. Obično sakupljam kada veo još nije puknuo, prvo, to smanjuje broj dobivenih gljiva (da, da, događa se), i drugo, snaga takvih gljiva je nešto veća od one gljiva s otvorenim šeširom.

Čekamo do trenutka kada najranije gljive prvog vala dostignu željenu veličinu. Obično je to 5-8 velikih gljiva. Pažljivo ih skupljamo, pokušavajući ne ometati ostale. Ako nešto vuče sa sobom, i to uklanjamo.

Zatim zatvorimo tubu kakva je bila i čekamo još nekoliko sati (od 3 do 18) skupljajući kampanju koja dođe u željeno stanje. Naravno, one gljive kojima je suđeno da pobace, ne čekaju dok ne prestanu. Ne očekuju se ni oni koji nisu izašli iz rasta (iz pojedinačnih mikrokolonija). Nakon najviše 18 sati, blok se mora očistiti.

Tijekom početnog pribadanja stvaraju se primordije koje daju prva dva vala, pa je potpuno čišćenje bloka za revnog uzgajivača gljiva jednako udaranju srpom po jajima.

Potrebno je odstraniti gljive koje imaju izraženu stručak i klobuk, a koje su tamnije boje (počele su pokazivati znakove propadanja). Ako vidite gljivu, ali je još uvijek blizu jajolikog oblika, nemojte je dirati, vrlo je vjerojatno da će iz nje izaći velika lijepa gljiva drugog vala. Pomoći će vam privući oko što se isplati čistiti, a što ne, samo praksa i fotografije koje još nisu snimljene.

Eksperimentalni blok s pobačajima

Što ako uopće ne očistite blok? Ne baš, berba gubi vrijeme i trud, a sutra još uvijek možete rano ustati, dobro, ha?

Rečeno, učinjeno. Drugi val juri, neuklonjeni pobačaji degradiraju, tamne, plave i

gubeći svježinu. Mnogi od njih su dlakavi na nogama. Mnoge apsorbira micelij,

Poglavlje: Žetva

pahuljice ispod nogu gljiva drugog vala. Hvatam drugi val. Mali pobačaji prvog vala u ovom trenutku uopće ne izgledaju veselo. Njihova se mala tijela smanjuju i počinju savijati pod vlastitom težinom. Unatoč ne vedrom izgledu, nije uočena kontaminacija i donesena je odluka da se blok rehidrira prije trećeg vala u istom obliku u kakvom jest, bez čišćenja. Blok konačno prelazi u eksperimentalnu kategoriju.

Nakon 6 sati rehidracije, blok se uklanja iz cijevi i šalje u stiskalicu na stalku. Sve što strši iz nje izgleda glupo, natopljeni umirući pobačaji mjestimično izgledaju kao komadići sive sluzi zalijepljeni za podlogu. 3-4 dana blok postaje dosadan i ništa se ne događa, 5. dan počinje lagano pahuljasti micelij. Pahuljice također rastu na pobačajima, iako ih ne pojedu u potpunosti, na nekim mjestima počinju se penjati nove igle; još ih nema mnogo, ali po izgledu se može shvatiti da će izaći velike.

Ukupno je blok živio 5 valova i izbačen je, ali ne zato što je bio kontaminiran, već zato što se jako smanjio i osušio.

Pouka ove priče je da ako ne rastete na čistom žitu, ne morate čistiti blok. Jedini momenat je da nakon drugog vala blok prelazi u prostor bez zidova, u paket, pa stoga vlaga ima sposobnost isparavanja sa cijele površine bloka. Prozračnost je prisutna podjednako sa svih njegovih strana. Ako ostavite blok u spremniku nakon 2. vala, možete dobiti abortivnu trulež na rubovima i dnu spremnika.

Moja teorija je sljedeća. Budući da gljive teže preživjeti, za to će koristiti bilo koji resurs. I mislim da je sasvim realno i prihvatljivo da sami sebi oduzmu umiruće dijelove, kako bi obnovili vlastitu zalihu. Mislim da je to ono što rade dok je blokada dosadna nakon rehidracije.

Odvoz, sušenje i skladištenje

Puno je napisano o tome kako ukloniti gljive iz bloka. Netko piše za rez, netko za uvijanje, netko za ljuljanje. Ja sam za sve metode osim za rezanje s ostavljanjem panjeva, obično je ili uvrnem ako je gljiva pojedinačna ili je iščupam nakon što je zamahnem u stranu ako gljive rastu u hrpi ili u hrpi. Jedino na što treba pripaziti je da se sve što se proteže uz gljivu također odstrani. Odnosno, ako se komadić micelija odvojio od gljive, ne morate ga pokušavati vratiti, misleći da će narasti itd.

Prije sušenja gljive je potrebno očistiti od ostataka podloge. Ovo se također radi kako želite, možete ostrugati ili odrezati, svejedno je. Glavni cilj je čista gljiva iz supstrata.

Dok sam još bio početnik u uzgoju gljiva, svoju oskudnu berbu sušio sam na kojekakve komplicirane načine, zatvorene kutije s desikantima, pečenu rižu i tako dalje. U jednom sam trenutku shvatio apsurdnost svih tih pothvata i kupio si višeslojnu električnu sušilicu. Dao sam 1200 rubalja za to i zaboravio na sav gimmor. Sušim na 30C s ugrađenim ventilatorom. Sušenje se odvija oko 24-30

Poglavlje: Žetva

sati. Gljive suhe do stanja kolačića stavljaju se u papirnatu vrećicu od McDucka, a zatim u plastičnu vrećicu.

Trajanje skladištenja

Za skladištenje ne koristim hladnjak, ne vidim smisao u tome. Ne, ozbiljno, ako imate puno gljiva, nema smisla zavaravati se da će neke od njih nestati u maloj količini.

Štoviše, iskustvo kaže da čak i nakon što leže godinu i pol dana u nepropusnoj drvenoj kutiji, na sobnoj temperaturi, gljive zadržavaju svoju krutost na visokoj razini. Dobro se sjećam dana kada sam pronašao ovaj nick i odlučio ga testirati. Bacio sam gljive na vagu, na displeju se prikazala brojka od 5,5 g. Procjenjujući koliko su ležale (a potamnile su i lako se raspale, gotovo u prah), mislio sam da su malo manje nego potpuno izgubile snagu.

Ne nadajući se njihovoj učinkovitosti, samljeo sam ih, zalijepio vodom i otišao u Auchan kupiti nešto za doručak. Bilo je divno sunčano jutro. S tamnijim naočalama odgazio sam se do trgovine. Kako sam se približavao odredištu, počeo sam osjećati poznato perceptivno migoljenje. Ocijenivši ih beznačajnima, ušao sam u Auchan i, uzevši kolica za namirnice, počeo se penjati prolazima. U jednom sam trenutku osjetio da me jako vuče. Na odjelu sira shvatio sam da me nije prihvatio kao dijete: pultovi su disali, a natpisi na cjenicima neće biti čitljivi. I sam sam bio prilično buran i ljudi su počeli zazirati od mene.

Procjenjujući situaciju, shvatio sam da mi košarica više ne treba, a sama pomisao da ću morati stajati u redu na blagajni i plaćati blagajnici činila mi se nerealnom.

U ušima mi se pojavila sve veća tutnjava u kojoj sam razaznao desetke različitih glasova, ali postojao je osjećaj da svi govore različitim, nerazumljivim jezicima. Atmosfera se počela pritiskati, mase ljudi oko mene s kolicima i košarama slile su se u jednu potrošačku struju, nevjerojatno debela teta mi je zdesna vikala, ali kao da mi je bila u uhu: "Uzmi Coca Colu!" Sa moje lijeve strane, još veći ujak, očito njen suprug, mahnito je počeo trpati 2 paketa od 6 boca kole od 2 litre u svoja kolica. U jednom trenutku mi se zagušilo, shvatio sam koliko ova obitelj pije tog blata, shvatio sam odakle im tolika mast. Gadilo mi se, u jednom trenutku u nos mi je udario zagušljiv miris znoja debelog čovjeka s Coca Colom. U grlu mi je stala knedla i pozlilo mi je.

“Moramo otići odavde” – sijevnulo mi je kroz glavu. Naglo sam skočio i krenuo prema izlazu, obuzdavajući nagon za povraćanjem. Povraćao sam od Ashana, kao što bi pravednik povratio od Sadoma i Gamore.

Izbivši na ulicu, nekoliko puta sam duboko udahnuo i primijetio da je mučnina nestala. U ovom sam trenutku cijenio dubinu putovanja, gledao sam pločice od kojih je bio postavljen teritorij ispred trgovačkog centra i nisam se mogao uhvatiti za

Poglavlje: Žetva

jedan komad pokrivača. Nepretenciozan, obično prirodan uzorak na pločici imao je vlastiti život. U jednom trenutku mi se činilo da moja visina raste, u drugom kao da se smanjuje. Pokušavajući stabilizirati sliku, zagledao sam se u pod. Ovdje sam osjetio neku nelagodu, neki opresivni osjećaj straga. Pogledao sam okolo i vidio skupinu momaka kako stoje u blizini i veselo me gledaju. Tada mi je palo na pamet da stvaram nestvarno srne, stojim lagano nagnut nad podom i zabijam se u pločicu, lagano mičući glavom pokušavajući vidjeti šare na pločici. Shvatio sam da je netko negdje pogriješio, a gljive koje dugo leže ne gube toliko svoju aktivnost. Nakon što sam na brzinu procijenio poravnanje u kojem sam ispravio 5,5 na suho i otišao u Auchan, postalo mi je jako smiješno. Onda su mi misli skočile na to da još uvijek stojim na istom mjestu i držim se, samo ne na pločici, nego na društvu frajera. Štoviše, dečki su se već nasmijali i počeli vrpoljiti, ne shvaćajući što se mota po mojoj glavi na temu njihova društva.

Okrenuo sam se i otišao s ovog mjesta. Usput sam visio na klupi u jednoj od slabo naseljenih uličica.

Par puta sam ne slabo bačen s ovog svijeta u drugi. Putovanje je ispalo više nego dobro i snažno. Zaključak koji sam napravio u praksi je sljedeći: ako su gljive ostale suhe i pohranjene manje od 1,5 godine, ne treba misliti da su oslabile ili nisu aktivne. Budi oprezan!

Poglavlje: Žetva

Uklanjanje otiska spore

Dobro je kad ima otisaka, a loše kad ih nema. Dobro se sjećam vremena kada nisam imao otiske i kako sam kidao guzicu da se dočepam sadnog materijala. Moj prvi ispis došao je od korisnika s nadimkom BT5, na čemu sam mu zahvalan. Nažalost, gljivama nije bilo suđeno da izrastu iz ovog otiska (ili bolje rečeno iz poslane polovice ispisa). Neumjereni entuzijazam i krive ruke učinile su svoj prljavi posao, a ja sam se vratio na točku s koje sam krenuo. Drugi otisak mi je došao ne preko ovog foruma, nego zaobilaznim putem preko poznanika poznanika, mojih poznanika. Nakon što sam pripremio sve što mi je potrebno, počeo sam ispisivati otisak, da bih ga ostrugao u čašu za izradu suspenzije spora. Ono što sam zatekla unutar neprecizno zgužvane folije me jako iznenadilo i uzrujalo. Bila je tu neshvatljiva kaša od spora i neke sluzi odvratnog mirisa. Naravno, nemajući ništa drugo, za sreću sam sve to strpao u štrcaljku i cijepio zrno. Sve je, naravno, vrlo brzo i zanosno sjebano. Onda sam dvaput pokušao iza brda naložiti svađe, ali jao, buržoazija je zajebala našeg brata, i ništa. Nikada nisam dobio otisak, ali sam stekao divnog prijatelja s kojim sam kasnije bio do njegove smrti. Korisnik Unambo (smiješno je ako mu nadimak pročitate obrnuto, ispada obmanU, kako je on volio reći "vara obrnuto", a zapravo je bio vrlo poštena i pristojna osoba) je pristao na sastanak na jednoj metro stanici i pružio mi kantu sijena, obraslu micelijem. Ovo je bila Kambodža i to su bile prve gljive koje su tada rasle u mojim krivim rukama. Prvi printovi koje sam radio nisu bili baš promišljeni i dizajnirani, sad bih ih nazvao pederima..s.

Sada razumijem da otisak, osim što mora sadržavati spore, mora biti i čist, kompetentno uklonjen, pogodan za vađenje spora iz njega, pametno upakiran i nužno potpisan.

Za skidanje otisaka koristim grill foliju, debela je, čvrsta, zgodno je raditi s njom i prije skidanja otisaka i kod skidanja spora za vaše potrebe.

i za uzimanje jednog ili dva otiska.

1. Od deblje folije izrežite traku širine oko 3 cm više od promjera klobuka šampinjona, a dužine dvije širine. Oni za kapu gljive promjera 5 cm, veličina pravokutnika folije bit će 8x16 cm.

2. Pripremamo posudu s poklopcem. Koristim posudu kao iz monotube. Ima poklopac i njegova površina je dovoljna za dovoljan broj otisaka. Obrišite unutrašnjost posude alkoholom.

3. Pamučnim štapićem na glatkoj površini obrišite traku folije s obje strane. Potrebno je obrisati pritiskom kako bi se pažljivo zagladile trake folije, moraju biti savršeno ravne.

4. S unutarnje strane preokrenutog poklopca položite trake folije, ponovno ih prebrišite alkoholom i poklopite posudu.

Sada kada je sve spremno za skidanje otisaka, potrebno je odabrati plodište. Postoji mnogo različitih teorija o tome koja bi plodna tijela trebala biti utisnuta. Neki kažu da je uzmite od najvećih gljiva, drugi kažu da je uzmite od gljiva 3. vala, jer tamo ima najviše "zrelih" spora, netko općenito savjetuje da se ne zavaravate i pucate iz bilo koje gljive. Netko uklanja sporove iz šešira koji su upravo otvoreni, a netko čeka dok se rub šešira ne savije. Osobno sam mišljenja da što je micelij mlađi, a otisak podeblji, to bolje. Stoga preporučujem uzimanje gljiva za otiske iz prvog vala i otvorene do stanja kada ploče koje nose spore još ne strše izvan ruba klobuka. Odnosno, ako izvadite stabljiku odmah do poklopca i stavite poklopac na površinu, on će se nasloniti na svoje rubove, a ploče neće dodirivati površinu. To će omogućiti, prvo, smanjenje broja bilo kakvih bonusa izvana (jer ništa neće letjeti ispod šešira tijekom sporulacije), i drugo, koncentrirat će spore u jedan prekrasan otisak i ništa neće izletjeti izvan rubova šešir.

5. Izvadite odabranu gljivu iz podložne ploče, klobuk položite na čistu površinu. Britvicom obrisanom alkoholom (ja koristim britve tipa rapier, kao za sovjetske britve) pažljivo odrežite nožicu ispod šešira, tako da preostali "batrljak" ne strši izvan razine rubova šešira ako stavlja se sporonosnim pločicama prema dolje.

6. Čistom pincetom pažljivo uzmite šešir i stavite ga na jednu od pripremljenih traka folije tako da zauzme otprilike sredinu polovice trake. Ideja je da će traka biti presavijena na pola, a otisak će se nalaziti u središtu jednog od dijelova.

7. Ponovite s ostalim šeširima.

8. Sada kada su svi šeširi poslagani na trake folije, iz boce sa raspršivačem lagano poprskajte posudu kojom ćete sve pokriti. Pokrijte i zaboravite na 12 sati.

Pitanje je zašto prskati posudu vodom? Sve je vrlo jednostavno. Mislim da su se mnogi ljudi susreli s činjenicom da izvrsne gljive proizvode tekuće otiske ili uopće ne izlijevaju spore na nosač. To se događa jer gljiva može sipati spore samo uz dovoljnu vlažnost. Nakon što gljiva izgubi vezu s blokom i klobuk izgubi vezu s drškom, klobuk postaje vrlo sklon sušenju. Ne zaboravite da su kolonije micelija koje tvore plodno tijelo žive i potrebna im je visoka vlažnost da bi "radile". Isprobajte i uvjerite se da kod sporulacije na nosaču ovlaživanje zraka uvelike poboljšava učinkovitost procesa. Oni koji su vidjeli moje otiske moći će potvrditi da su otisci i sa malih šešira jako masni. I mogu se koristiti više puta.

9. Kada vrijeme prođe, pripremite iglu natrljanu alkoholom i otvorite posudu.

Poglavlje: Uklanjanje otiska spore

10. Podignite iglom rub šešira, lagano ga zabacite tako da odleti s folije, a da ne razmaže otisak.

11. Nakon što to učinite sa svim šeširima, zatvorite posudu i ostavite da se otisci suše oko 10 minuta.

To je učinjeno kako zaostala vlaga ne bi oštetila otisak tijekom skladištenja (tamo se čak može pojaviti sluz).

12. Presavijte traku folije na pola duž široke strane, zagladite pregib prstom

13. Savijte na jednu stranu rubove trake uz bočne strane, koji su bili dugi 0,5 cm prije presavijanja na pola. Peglajte nabore

14. Presavijte preostali nezapečaćeni rub na drugu stranu.

15. Otisak je spreman, ostaje ga spremiti u istu traku folije, ali većeg kalibra i potpisati.

Kao što je vjerojatno frapantno, otisci dobiveni na ovaj način nisu sterilni, oni se jednostavno dobivaju u relativno čistim uvjetima. Kod prebacivanja u štrcaljku za cijepljenje zrna koristim gentamicin 1ml na 10ml vode. Ovo je dovoljno kako bi se osiguralo da nema zastoja. Kod inokulacije agara, naravno, povećavaju se šanse za unošenje nepotrebnog sranja, ali postoji potpuno drugačiji princip rada. Kultura se nosi u čistim komadima veličine zrna riže, i to na samom početku rasta. Standardno uništavanje čašica u ravnim rukama obično ne prelazi 15%. Također ću reći da je dobivanje sterilnih otisaka čitava zbrka, a tehnički je teško. Još je teže održavati njihovu sterilnost tijekom skladištenja.

Ispisuje na papiru

Došao sam ovdje na Olechku razgovarati o otiscima na papiru. Kao, ne volim foliju, želim otiske na papiru. Kako ga sterilizirati?

Odgovorio sam: "Iron blea!" - smiješno, ne raspravljam. Ali ipak, metoda je uhodana. Istina, ostavljen u prošlosti, jer dugo nije snimljen na papiru. Dakle, izrađujemo sterilni papir za otiske.

Uzimate običan list iz tiskare. Režete ga za otiske. Zatim uzmete još 2 lista i zalijepite ih po rubovima tankom trakom. Izrezani papir za ispise stavljate u tako dobivenu "mapu". Zalijepite ga na isti način. Ispada gotovo zatvorena omotnica.

Onda ga staviš na ravnu tvrdu podlogu i maksimalno ga zajebeš peglom uz koju para para usput. Nekoliko minuta i sterilni papir za otiske je spreman.

Poglavlje: Uklanjanje otiska spore

Zagađivači

Svaki iskusni gljivar će vam reći da je u životu izbacio mnogo kilograma žitarica i drugih supstrata. To je normalno i ne biste se trebali uzrujavati i odustati zbog toga. Čak i za super frotirne uzgajivače gljiva, norma je razmak od 10-15%. Sve ovisi o potencijalnoj složenosti i rizičnosti operacije. Najveći postotak fakapa stoji iza operacija kao što su g2g (cijepljenje zrno na zrno) i prijenos agara.

Postotak gubitaka je veći što je opseg vašeg hobija veći. Velike količine supstrata zahtijevaju promjenu pristupa uzgoju, jedno je supstrat raditi s velikom žlicom alkohola, a nešto sasvim drugo kada u rukama imate vrtnu vilu ili lopatu. Količina potencijalnih kandidata za jelo nekoliko kockica vašeg prekrasnog komposta bit će naravno veća. A proces stvaranja uvjeta za pasterizaciju takvih volumena supstrata bit će teži.

Ali natrag na male količine. Dobra vijest je da ovdje možete postići gotovo potpuno odsustvo problema s konkurentskim organizmima. Ostale novosti, za ovo ćete morati primijeniti trenutna tehnička rješenja, uključujući i ona opisana u ovoj knjizi.

Također je potrebno vrlo kvalitetno i potpuno uvesti gljive u život. Morate se pokušati staviti na mjesto gljiva. Shvatiti kako rastu, hrane se, razmnožavaju i kako se sve to uklapa u uvjete njihovog staništa.

Mnoge stvari su mi sugerirale same gljive, zadatak seanse je bio naučiti nešto o životu gljiva koje jedem. Tijekom sesije pratila me potpuno zarasla tegla micelija. Vrlo snažno iskustvo, preporučujem. Razmotrite ih i suočite se s njima pitanjima u svom umu, empatično. Pokušajte se poistovjetiti s njima, biti oni, posjetiti tamo gdje rastu.

Natjecanje za resurse u svijetu mikroorganizama zahtijeva određene značajke reprodukcije. Treba biti brz, a broj proizvedenih potomaka mora biti velik. I zapravo je tako. Što je organizam jednostavniji, to mu je životni ciklus brži. Prema tome, niže gljive uvijek će rasti brže od viših. Cubensis, naravno, pripada višim gljivama, a konkurenti: neki višim (ali jednostavnijim), neki nižim. Zadatak kultivatora je stvoriti uvjete u kojima se stvara hendikep, tako da njegovi štićenici imaju vremena prvi zauzeti podlogu.

Sterilnost istog zrna u staklenci nije apsolutna vrijednost. S vremenom pada, bez obzira na to koliko je dobra zaštita barijere. Dobra vijest je da vam staklenke sa zaštitom opisanom u ovoj knjizi omogućuju da zadržite pritisak kontaminacije najmanje 8 tjedana (osim ako je zarazu u staklenku unio sam operater).

Poglavlje: Zagađivači

Brzina umnožavanja u konkurentima je velika, te, tko je već imao neuspjele iskustvo, po dostojnosti su ocijenili kako bodro kolonizira banku trihoderma ili crnca. Oh, takvi pokazatelji brzine do kockica ...

Mnoge jednostavne gljive jednostavno ne formiraju plodna tijela. Recimo Trichoderma, koja pripada rodu Hyphomycetes. Tvore kondijene (posebne okomite izrasline iz micelija) iz kojih se raspršuju njihove spore (kondije). Potrebno je malo vremena da se formiraju, a sporulacija je obilna. U zatvorenim prostorima i na povišenim temperaturama trihoderma se širi brzinom šumskog požara. Ovo je posebno olakšano prisutnošću područja s anaerobnim uvjetima u supstratu. U anaerobnim uvjetima u supstratu se stvaraju brojne organske kiseline koje su za Trichodermu najteže.

Trichoderma

Na primjeru trichoderma postaje jasno da su zapovjednici bili u pravu kada su rekli: "Upoznaj svog neprijatelja." Poznavanje vaše konkurencije olakšava vam suočavanje s njima.

U prirodi je Trichoderma bakterija tla, pa ju je vrlo jednostavno unijeti pokrovnim slojem koji sadrži zemlju. Uz nedovoljnu sterilizaciju kućišta, šanse za stvaranje novog "prijatelja" su vrlo velike. Ako se u supstrat doda pufer s bazičnom reakcijom, npr. gips, to prirodno sprječava pojavu trihodermije (naravno, u razumnim granicama).

Na prve znake pojave trihoderme kolač ne bez žaljenja bacite, a prostor u kojem je stajao podvrgnite najdetaljnijem dezinfekciji najstrožim metodama. Domestos pomoć! Nikada nemojte čekati dok se ne razmnoži, bacite ga ODMAH! Ova vrsta proizvodi mnogo vrlo malih i žilavih spora. Jednom kada plodovi u vašem stakleniku mogu uzrokovati dugi niz frustracija zbog zaraze njime. Ako još uvijek koristite staklenik s ekspandiranom glinom ili perlitom, zamijenite ih novima ili namočite stari u otopinu domestosa ili drugu tekućinu koja sadrži klor.

Ako koristite staklenike ili monotube s filterima, sve to tretirajte izbjeljivačem, a filtere svakako zamijenite novima.

Nikada ne otvarajte staklenke zahvaćene Trichodermom na mjestima gdje se odvija rast. Da biste se riješili oboljelog zrna, prvo otvorite staklenku i napunite je vrućom vodom, a tek nakon toga je možete početi istresati u WC školjku. Isto pravilo vrijedi za svaku zaraženu staklenku. Organizmi koji nose spore šire se uglavnom zrakom, napunite teglu vodom, spore se talože i ne raspršuju se u kupaonici ili WC-u. Naravno, manjim dijelom sami

Poglavlje: Zagađivači

smokva izleti, pa pokušajte biti minimalno obučeni prilikom istresanja (spore se u velikom broju lijepe za odjeću), a odmah nakon vađenja tegle operite ruke do lakata antibakterijskim sapunom.

Anaerobni uvjeti za kontaminante

U mnogim priručnicima i korisničkim postovima možete pronaći reference na činjenicu da tijekom kolonizacije gljive praktički ne trebaju svjež zrak. To nije sasvim točno, a velika je razlika između povećanog ugljičnog dioksida i nedostatka kisika.

Da biste razumjeli ovu razliku, trebate se pokušati staviti na mjesto gljiva. Većina naših omiljenih gljiva svoj životni ciklus provodi u gornjim slojevima plodnog sloja zemlje. Obično je dubina njihovog staništa do 15-ak centimetara. Sve dublje nema potrebne uvjete za njihov rast.

Ovisno o komponentama koje tvore plodni sloj tla, njegova će prozračnost biti različita, a prirodno će se pogoršavati s povećanjem dubine.

Uvjet za plodonošenje cubensisa je pojava stalne izmjene zraka.

Pod stalnom izmjenom zraka mislim na organizaciju istodobne opskrbe kisikom i uklanjanja ugljičnog dioksida. Za stadij kolonizacije nije potrebna organizacija odljeva ugljičnog dioksida, ali je neophodan dotok kisika. Sada se nadam da je razlika jasna. Budući da je ugljični dioksid teži od zraka, širi se po površini podloge i ostaje u tegli ili posudi, čak i ako je rupa zračnog filtra velika, pa nije strašno ako je rupa za ventilaciju tegle promjera najmanje 3 centimetra , strašno je ako je manji od 8 mm. Naravno, što je veći volumen korištenog supstrata, to je potrebno više kisika za njega. A ako govorimo o posudi od 3 litre, onda je jedna rupa od 8 mm, kao na poklopcu staklenke, neizostavna. Osim što je gljivama potreban zrak za rast, potrebno je spriječiti stvaranje anaerobnih uvjeta u kojima će razvoj patogene mikroflore biti stvar kratkog vremenskog razdoblja.

Pitanje opskrbe kisikom tijekom kolonizacije posebno je važno i kritično kada se koriste sintetski supstrati na bazi kokosovih vlakana. Budući da je njegov udio prilično mali, a sposobnost zadržavanja vode velika, za dostatnu prozračnost sloj supstrata ne smije biti deblji od 15 cm (bolje i manje), a ventilacijski otvori trebaju biti dovoljno veliki. Naravno, inkubacija bi se trebala odvijati tamo gdje je izmjena zraka slobodna, inače neće biti smisla u otvorima.

Odsutnost anaerobnih zona u supstratu jedan je od važnih čimbenika koji djelomično rješavaju problem kontaminacije mnogim vrstama bjaka.

Poglavlje: Zagađivači

Ponekad je za točnu identifikaciju gljivice potrebno znati boju praha spora. Zašto govorimo o "prašku spora", a ne o boji spora? Jedna spora se ne vidi golim okom, ali ako su nasuta u masi, u prahu, onda se vide.

U stranoj literaturi koristi se izraz "spore print", kratak i prostran. Prijevod se pokazao dužim: "otisak praha spora", riječ "otisak" ovdje možda nije sasvim točna, ali se ukorijenila i koristi.

Prije nego započnete postupak dobivanja "otiska spora" kod kuće, pažljivo pregledajte gljive u prirodi, na mjestu sakupljanja. Odrasli primjerci velikodušno rasipaju spore oko sebe - to je prirodni proces razmnožavanja, jer gljive, odnosno njihova plodna tijela, ne rastu da bi dospjela u košaru berača gljiva: spore sazrijevaju u njima.

Obratite pozornost na obojenu prašinu koja pokriva lišće, travu ili tlo ispod gljiva - to je to, prah spora.

Primjeri, ovdje je ružičasti prah na listu:

Ali bijeli prah na listu ispod gljive:

Gljive koje rastu blizu jedna drugoj posipaju spore po šeširima svojih niskih susjeda.

Međutim, u prirodnim uvjetima prah spora nosi vjetar, ispire kiša, može biti teško odrediti njegovu boju ako se izlije na obojeni list ili svijetli šešir. Potrebno je dobiti otisak praha spora u stacionarnim uvjetima.

Nema ništa teško u ovome! Trebat će vam:

papir (ili staklo) gdje ćemo sakupljati prah
čaša ili šalica za pokrivanje gljive
Zapravo, gljiva
malo strpljenja

Da biste dobili "otisak spora" kod kuće, morate uzeti relativno zrelu gljivu. Gljive s neotvorenim klobukom, premlade ili gljive s očuvanim velom nisu prikladne za otisak.

Ne preporučuje se pranje gljive odabrane za otisak spora. Pažljivo odrežite nožicu, ali ne samo ispod šešira, već tako da na ovaj rez možete staviti šešir što bliže površini papira, ali tako da pločice (ili spužva) ne dodiruju površinu. Ako je šešir prevelik, možete uzeti mali segment. Gornju kožu možete navlažiti s nekoliko kapi vode. Našu gljivu pokrivamo čašom kako bismo spriječili propuh i prerano sušenje šešira.
Ostavimo nekoliko sati, najbolje preko noći, na normalnoj sobnoj temperaturi, nikako u hladnjaku.
Za balegara se to razdoblje može skratiti, kod njih se sve događa prebrzo.

Za relativno mlade gljive može potrajati dan ili čak i više.
U mom slučaju smo tek nakon dva dana uspjeli dobiti otisak takvog intenziteta da se razazna boja. Kvaliteta nije bila baš dobra, ali pomoglo je da se jasno identificira vrsta, prah nije ružičast, što znači da nije entolom.

Kad podignete čep, pazite da ga ne pomaknete, nemojte razmazati sliku: spore su pale okomito prema dolje bez kretanja zraka, tako da ćemo vidjeti ne samo boju praha, već i uzorak ploča ili pora.

To je, zapravo, sve. Dobili smo otisak praha spora, možete fotografirati za identifikaciju ili samo "za uspomenu". Neka vam ne bude neugodno ako prvi put ne dobijete lijepu sliku. Glavna stvar - boja praha spora - naučili smo. A ostalo dolazi s iskustvom.

Još jedna točka ostala je neodređena: koju je boju papira bolje koristiti? Za lagani "ispis spora" (bijelo, krem, krem) logično je koristiti crni papir. Za tamno, naravno, bijelo. Alternativna i vrlo prikladna opcija je napraviti ispis ne na papiru, već na staklu. Zatim, ovisno o rezultatu, možete pogledati ispis, mijenjajući pozadinu ispod stakla.

Slično, možete dobiti "otisak spora" za ascomycetes ("torbarske" gljive). Treba napomenuti da aksomicete rasipaju spore oko sebe, a ne prema dolje, pa ih pokrijemo širom posudom.

Priprema otiska spora

Da biste napravili otisak spora, najbolje je uzeti gljive iz drugog ili trećeg vala plodonošenja. U pravilu rastu znatno manje nego u prvom valu, pa se ne treba mučiti s izborom hoće li sakupljene gljive ostaviti za konzumaciju ili ih koristiti za dobivanje spora. Osim toga, kao što praksa pokazuje, u gljivama iz drugog i trećeg vala dobivaju se najmasniji otisci.
Birajte velike gljive s tamnijim šeširom od ostalih gljiva. Gljive s tamnom kapicom proizvode više spora od ostalih. A birajući velike primjerke, time odabirete najpotpunije, zdrave gljive iz potoka. Imajte na umu da odabirom gljiva po jednom ili onom svojstvu, vršite selekciju, uslijed koje slijedeće generacije gljiva mogu imati sva svojstva za koja je napravljena selekcija.
Kapica gljive, do trenutka kada se spore sakupe, trebala bi se potpuno otvoriti, a neke od spora do tog vremena već bi mogle početi dovoljno spavati. Gljiva nastavlja proizvoditi spore dosta dugo (2-4 dana), tako da se ne možete bojati da će prosute spore utjecati na kvalitetu ispisa. Naprotiv, spore koje su počele izlaziti iz klobuka jasna su potvrda da je gljiva počela stvarati spore, te da se otisak spora u svakom slučaju može dobiti.
Sve radnje za pripremu otiska spora moraju se provoditi u sterilnim uvjetima. Da biste to učinili, potrebno je tretirati sobu baktericidnom svjetiljkom ili koristiti sterilnu kutiju.
Možete pripremiti otisak spora na gotovo svemu -
na sve što ima ravnu površinu, a s čime će vam kasnije biti zgodnije raditi i što će biti zgodnije za skladištenje.
Najčešće se u te svrhe preporuča koristiti komad debelog papira, folije ili stakla.
Najprikladnije je napraviti ispis na debelom papiru (na primjer, na razglednici). staklo ili folija nisu uvijek prikladni za ove svrhe. Na primjer, staklo se ne može slati poštom, a folija se često lomi tijekom cijepljenja kada dođe u dodir s omčom za cijepljenje.

Procedura za izradu otiska spora je sljedeća: Sterilni komad debelog papira (ili nešto slično), malo veći od klobuka gljive, stavi se u sterilnu Petrijevu zdjelicu, zatim se gljiva uzme sterilnim škarama (ili skalpelom) i odreže se klobuk što je moguće bliže sloju sa sporama (himenoforu) i položi klobuk na papir s slojem koji nosi spore prema dolje. Zatim se Petrijeva zdjelica zatvori i skloni na jedan dan, negdje na tamno mjesto. Za jedan dan, (nema smisla duže čekati, jer zrele spore, u pravilu, za to vrijeme uspiju dovoljno odspavati, a gljiva više ne proizvodi nove spore) milijuni spora izlete iz reza. skinuta kapica, stvara tamnoljubičastu mrlju na papiru (otisak spora).
Boja otiska spora, koja je uvijek ista za svaku vrstu gljive, važna je značajka u njezinoj determinaciji.
Nakon izlijevanja spora, Petrijeva zdjelica se otvori, s nje se skine klobuk gljive, a papirić s otiskom spore sterilnom pincetom stavi u sterilnu vrećicu s patentnim zatvaračem odgovarajuće veličine za pohranu.
Sve radnje za prijenos otiska spora iz Petrijeve zdjelice u vrećicu također se moraju provesti u sterilnim uvjetima.

Kako bi se osigurala sterilnost vrećice, potrebno ju je iznutra i izvana prebrisati alkoholom i pustiti da alkohol ispari (ako se to ne učini, preostali alkohol neće imati kamo otići u zatvorenu vrećicu, a neke od spora mogu umrijeti zbog kontakta s alkoholom). Sterilnost Petrijeve zdjelice postiže se i brisanjem alkoholom izvana i iznutra. A papiriće koji će poslužiti za pripremu otiska najprikladnije je sterilizirati u ekspres loncu (ili loncu), nakon što ih izrežete i stavite u staklenku s čepom na navoj. Sterilizacija se provodi 30-60 minuta, nakon čega se staklenka ostavi da se ohladi na sobnu temperaturu. Sterilni papirići se vade iz staklenke sterilnom pincetom neposredno prije upotrebe. Sve alate prije rada također treba tretirati alkoholom.

Umjesto Petrijeve zdjelice možete koristiti nisku staklenku s čepom na navoj. U tom slučaju poklopac ne smije biti hermetički zatvoren - od toga se stvara povećana vlaga u staklenci, zbog čega se spore lijepe za sporonosne pločice i praktički ne spavaju dovoljno, ili spavaju dovoljno vrlo loše, stvarajući izrazito blijede otiske.

Za pripremu otiska možete koristiti i "klasičnu" tehnologiju, umjesto Petrijeve zdjelice (ili staklenke s navojnim čepom) koristiti tanjurić i čašu. Ali u ovom slučaju, vjerojatnost kršenja sterilnosti otiska je prevelika, zbog činjenice da je razina stakla na istoj razini kao i papir na koji se izlijevaju spore. Osim toga, čaša na tanjuriću je prilično nestabilan dizajn, a tijekom prijenosa s mjesta na mjesto čaša se vrlo često pomiče ili pada.

Razjasnit ću nešto - obično je potrebno 12-24 sata da se dobije podebljani ispis. kako bi gljiva lakše izlila spore 15-20 minuta prije rezanja, kape se poprskaju vodom iz boce s raspršivačem. također ima smisla ostaviti prazninu u šalici da ispari vlaga iz šešira.
Inače, sterilni otisak je fantazija i paradoks.
makar samo zato što je klobuk gljive umirući organski sa svim svojim zoološkim vrtom